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  • 纯化与鉴定

    0的碱性溶液中,染色体DNA氢键断裂,双螺旋结构解开而变性;共价闭合环状质粒DNA的大部分氢键断裂,但两条互补链不完全分离。当用pH值4.6的KAc(或NaAc)高盐溶液调节碱性溶液至中性时,变性的质.凝胶过滤层析法聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白质分离纯化及鉴定凝胶过滤层析法试验原理利用具有网状结构的凝胶的[ Tag ]

    纯化与鉴定Tag内容描述:

    1、啤酒酵母多糖的分离纯化与初步鉴定张丽霞1, 张丽萍2, 于文革1, 袁改霞1, 袁红梅1( 1 . 大庆师范学院生命科学系, 黑龙江大庆 163712 ; 2 . 东北师范大学生命科学学院, 吉林长春 130024)摘要?目的 从啤酒废酵母中分离纯化出多糖, 并对其组成和性质进行初步鉴定。 方法 用常规方法分离纯化啤酒酵母多糖, 并用 HPLC 、 比旋度测定和醋酸纤维薄膜电泳等方法测定 BPS2。结果粗多糖收率为 9 . 7 %, 为浅色粉灰。BPS2为均一组分, 苯酚 -硫酸法 测定其糖含量为 95 . 2 %, GC分析其单糖组成为Man和 Glc , 摩尔比为 1 . 08? 1. 00 。 结论试验提取的。

    2、霍 山 石 斛 多 糖 的 分 离 纯 化 及 结 构 鉴 定摘 要霍 山 石 斛 属 于 兰 科 , 多 年 生 草 本 植 物 , 主 要 分 布 于 中 国 安 徽 省 霍山 县 , 是 我 国 最 早 有 记 载 的 石 斛 类 中 药 材 , 具 有 巨 大 的 药 用 价 值 和 市场 潜 力 。 多 糖 是 霍 山 石 斛 中 最 主 要 的 活 性 成 分 之 一 , 研 究 发 现 霍 山 石斛 多 糖 具 有 抗 氧 化 、 抗 肿 瘤 、 抗 白 内 障 以 及 提 高 机 体 免 疫 力 等 作 用 。本 文 以 霍 山 石 斛 为 材 料 ,成 功 分 离 纯 化 了 一 种 多 糖 DHP-W2,对 它 的 结构 进 行 了 详。

    3、猪软骨型胶原蛋白的提取纯化与鉴定作者: 姜旭淦, 陈盛霞, 丁建霞, 王卉放, 马洁, 吴亮, 许化溪, JIANG Xu-gan, CHENSheng-xia, Ding Jian-xia, WANG Hui-fang, Ma Jie, WU Liang, XU Hua-xi作者单位: 江苏大学医学技术学院,江苏镇江212001刊名: 江苏大学学报(医学版)英文刊名: JOURNAL OF JIANGSU UNIVERSITY(MEDICINE EDITION)年,卷(期): 2006,16(5)被引用次数: 3次参考文献(8条)1.Cornelia MW;James WF;Jorg JG Immunosenescence autoimmunity and rheumatoid arthritis外文期刊2003(08)2.Deyl Z;Miksik I;Ec。

    4、HCO3的配制: 称取 NaHCO3 4.2005 g 定容至 至 500 mL b. 0.1M Na 500 mL c. 二者互兑至相应pH值 (13)SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)所需试剂(无需配制) 30%储备胶溶液:将29.0g丙烯酰胺(Acr)和1.0gN-N亚甲双丙烯酰胺(B。

    5、PD-L1蛋白的表达、纯化与鉴定作者: 毛丽伟, 倪兵, 姜曼, 黎万玲, 肖宇, 吴玉章, MAO Li-wei, NI Bing, JIANG Man, LI Wan-ling, XIAO Yu, WU Yu-Zhang作者单位: 第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所,重庆,400038刊名: 第三军医大学学报英文刊名: ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE年,卷(期): 2005,27(5)参考文献(13条)1.Shinohara T;TaniwakiM;Ishida Y Structure and chromosomal localization of the human PD-1 gene(PDCD1)外文期刊 1994(03)2.Finger L R;PuJ;Wasserman R The human PD-1 gene:com。

    6、中国修复重建外科杂志2008年1月第22卷第1期75大鼠胰岛的分离纯化方法改进与功能鉴定袁宇1 丛聪1 张静1 魏玲玲1 李胜富1 金熙1麦刚2 李幼平1 程惊秋1 陆燕蓉1【摘 要】 目的 通过改进胰腺消化和分离的技术条件, 提高成年大鼠胰岛分离纯化产率和质量。 方法 用胶原酶液灌注消化成年 SD 大鼠胰腺, 对胰岛分离纯化方法加以改进: 以 4 种比重的 Euro-Ficoll(F1: D=1.132, F2:D=1.108, F4: D=1.069) 和 Hank s 液 (F5: D=1.023) 不连续密度梯度离心, 以离心半径 15 cm, 2 000 r/min 于 4缓慢升降离心 20 min, 收集位于 F1 和 F2。

    7、啤酒酵母多糖的分离纯化与初步鉴定张丽霞1, 张丽萍2, 于文革1, 袁改霞1, 袁红梅1( 1 . 大庆师范学院生命科学系, 黑龙江大庆 163712 ; 2 . 东北师范大学生命科学学院, 吉林长春 130024)摘要?目的 从啤酒废酵母中分离纯化出多糖, 并对其组成和性质进行初步鉴定。 方法 用常规方法分离纯化啤酒酵母多糖, 并用 HPLC 、 比旋度测定和醋酸纤维薄膜电泳等方法测定 BPS2。结果粗多糖收率为 9 . 7 %, 为浅色粉灰。BPS2为均一组分, 苯酚 -硫酸法 测定其糖含量为 95 . 2 %, GC分析其单糖组成为Man和 Glc , 摩尔比为 1 . 08? 1. 00 。 结论试验提取的。

    8、作时应避免动作剧烈。 n弃去异丙醇时动作应轻,切忌甩干,以免DNA丟失。 n0.54-1倍的异丙醇可选择性沉淀DNA和大分子rRNA和mRNA,但 对5SRNA、tRNA及多糖不产生沉淀。一般不需在低温条件下长 时间放置。其缺点是易使盐类与DNA共沉淀;在DNA沉淀中的 异丙醇难以挥发除去,所以常规p管、滴头等 用品及ddH2O、试剂等应高压灭菌,操作尽量在4以下进行。 n混匀试剂、吸取上清液等操。

    9、 血清白蛋白、-球蛋白 的分离、纯化及鉴定 分离纯化的一般程序 选择材料 破碎细胞 提取 分离纯化 分析及鉴定 (粗分级,细分级) (预处理) 实验目的 通过从血清中分离、纯化、鉴定 血清白蛋白和 -球蛋白的实验,培 养学生综合应用盐析、离心、色谱 、电泳分光等技术来分离纯化特定 蛋白质的技能。 实验原理 。

    10、第 10 卷? 第 1 期解? 剖? 科? 学? 进? 展Vol. 10 ? No. 1 ? ? 2004 年PROGRESS OF ANAT OMICAL SCIENCES2004 大鼠睾丸支持细胞的分离纯化与鉴定 曹 ? 博, 郑俊波, 郭筠秋 ( 哈尔滨医科大学组织胚胎学教研室, 黑龙江 哈尔滨 150086) ?摘要? 目的? 简化大鼠睾丸支持细胞的分离纯化方法, 通过不同方法对 Sertoli细胞进行形态学观察鉴 定。方法? 取鼠龄 16 22天的雄性 Wistar 大鼠睾丸, 采用酶次第消化, 培养过程中纯化 Sertoli 细胞, 并用多 种方法对 Sertoli 细胞进行鉴定。结果? 大鼠睾丸支持细胞占培养细胞总数的 90% 以上。HE 染色, Ser。

    11、、1mol/L HCl、碳酸钙;0.4gNaOH固体、4.2ml浓HCL(分析纯) 、20gCa、革兰氏染液(结晶紫染液、卢戈氏碘液、95%乙醇、沙黄)、75%乙醇、香柏油、1mol/L NaOHCO3固体、酵母膏20g 、琼脂30g香柏油、脱脂奶粉100g 、蔗糖10g;2.仪器与设备 高压蒸汽灭菌锅、光学显微镜、培养箱、pH试纸、酸乳瓶、培养皿(9或12)、试管、300ml三。

    12、现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2008, Vol.24, No.2 161 杨桃中多糖成分的纯化与鉴定 杨桃中多糖成分的纯化与鉴定 朱银玲 1,2,谭竹钧2 (1.广东海洋大学现代生物化学实验中心,广东 湛江 524088) (2.广东工业大学轻工化工学院,广东 广州 510006) 摘要:本文对采用水煮乙醇沉淀法粗提出的杨桃多糖成分进行纯化与鉴定。首先将粗多糖用复合酶法去蛋白,然后用凝胶过滤 柱进行层析纯化,最后通过紫外、红外扫描对纯化后的多糖进行纯度和结构鉴定及分子量测定。初步鉴定的结果表明,杨桃多糖的平 均分子量为 4.373104,。

    13、 实验 血清-球蛋白的分离纯化与鉴定 【实验目的】 1.熟悉蛋白质分离提纯的技术路线 2.掌握盐析、凝胶过滤层析、离子交换层析等实验原理及操作技术。 【实验原理】 血清中蛋白质按电泳法一般可分为五类:清蛋白、_1 -球蛋白、_2 -球蛋白、-球蛋白和-球蛋白,其中-球蛋白室一类结构及功能相似的蛋白质,绝大多数免疫球蛋白属于-球蛋白,因此-球蛋白的分离纯化在医学研究中非常重要。 蛋白质的分离纯化室研究蛋白质结构及其生物功能的重要手段。 分离提纯-球蛋白时, 首先利用各种清蛋白在中性盐溶液中(常用硫酸铵)溶解度的差异而进行沉淀分。

    14、实训二 血清-球蛋白的分离纯化与鉴定目的要求1了解蛋白质分离提纯的总体思路。2掌握盐析法、分子筛层析法、离子交换层析等实验原理及操作技术。实验原理血清中蛋白质按电泳法一般可分为五类:清蛋白、1-球蛋白、2-球蛋白、-球蛋白和-球蛋白,其中-球蛋白含量约占16,100ml血清中约含1.2g左右。首先利用清蛋白和球蛋白在高浓度中性盐溶液中(常用硫酸铵)溶解度的差异而进行沉淀分离,此为盐析法。半饱和硫酸铵溶液可使球蛋白沉淀析出,清蛋白则仍溶解在溶液中,经离心分离,沉淀部分即为含有-球蛋白的粗制品。用盐析法分离而得的蛋白质中含有。

    15、树突状细胞的分离纯化与鉴定 自从 Stciman 首次发现树突状细胞(dendritic cell ,DC) 以来, 人们对 DC 的认识随着它的分离与纯化技术的改进而逐步深入, 认识的深入又进一步促进了 DC 分离与纯化技术的提高。现已能够从大多数组织中得到高纯度的、各具特异性的 DC。DC 的纯化方法包括两大类: (1) 物理方法: 根据细胞的黏附性进行分离, 有黏附分离法、尼龙毛分离法、羰基碳分离法, 各种淋巴细胞的黏附能力依次为巨噬细胞 DC = 抗体产生细胞 B细胞 T细胞; 根据细胞的大小比重进行分离, 包括聚蔗糖 2 泛影葡胺( Ficoll2 Paque) 密度梯度离心、 。

    16、安徽农业大学学报, 2009, 36(4) : 5892592 Journal ofAnhuiAgriculturalUniversity 纳豆芽孢杆菌的分离纯化及鉴定 3 李小丽,彭惠惠,唐欣昀 3 (安徽农业大学生命科学学院,合肥230036) 摘 要:根据纳豆芽孢杆菌耐热耐盐的特征分离纳豆芽孢杆菌菌株。由纳豆粉中分离纯化出1株纳豆菌株, 由家庭自制纳豆中分离纯化出5株纳豆菌株,并对这6株纳豆芽孢杆菌的细胞、 菌落形态及生理特性进行研究。 结果表明,这6株纳豆菌均属于枯草芽孢杆菌(B acillus subtilis)。 关键词:纳豆芽孢杆菌;分离纯化;鉴定 中图分类号:Q939文献标识码:A文章编号: 16722352X(。

    17、 凝胶过滤层析法 聚丙烯酰胺凝胶电泳 蛋白质分离纯化及鉴定 凝胶过滤层析法 试验原理 利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根 据被分离物质的分子大小不同来进行分离。 凝胶层析的原理 Kd=(Ve-Vo)/Vi 优点 条件温和 操作简便 损失少回收率高 层析柱可反复使用 凝胶及凝胶柱的选择 根据不同分子量选择不同凝胶 Sephadex: 交联葡聚糖 G-10,15,25,50 ,75,100,150,200;得水值 X 10 Sepharose:琼脂糖凝胶 Bio-Gel A Bio-Gel P:聚丙烯酰胺凝胶分子筛 Sephacryl:用N,N-亚甲双丙烯酰胺交联 的葡聚糖凝胶 凝胶柱的选择 凝胶的前处理 a。

    18、0的碱性溶液中,染色体DNA氢键断裂,双螺旋结构解开而变性;共价闭合环状质粒DNA的大部分氢键断裂,但两条互补链不完全分离。当用pH值4.6的KAc(或NaAc)高盐溶液调节碱性溶液至中性时,变性的质粒DNA可恢复原来的共价闭合环状超螺旋结构而溶解于溶液中;但染色体DNA不能复性,而是与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起形成缠连的、可见的白色絮状沉淀。这种沉淀通过离心,与复性的溶于溶。

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